Comment faire des dilutions en série?
Pour effectuer des dilutions en série, commencez par remplir plusieurs tubes à essai avec 9 millilitres d'un liquide de dilution, comme de l'eau. Ensuite, remplissez un tube à essai séparé avec 2 millilitres de votre solution non diluée. Ensuite, utilisez une pipette pour transférer 1 millilitre de la solution non diluée dans l'un des tubes à essai remplis du liquide de dilution. Une fois que vous avez fait cela, prélevez 1 millilitre de liquide dans le tube à essai que vous venez de remplir et transférez-le dans le tube à essai suivant. Continuez ainsi jusqu'à ce que vous ayez parcouru tous les tubes à essai. Pour apprendre à calculer le facteur de dilution final et la concentration, faites défiler vers le bas!
Pour effectuer des dilutions en série, commencez par remplir plusieurs tubes à essai avec 9 millilitres d'un liquide de dilution, comme de l'eau.
Une dilution en chimie est un processus qui réduit la concentration d'une substance dans une solution. Une dilution en série est la dilution répétée d'une solution pour amplifier rapidement le facteur de dilution. Il est couramment effectué dans des expériences nécessitant des solutions très diluées, telles que celles impliquant des courbes de concentration sur une échelle logarithmique ou lorsque vous déterminez la densité de bactéries. Les dilutions en série sont largement utilisées dans les sciences expérimentales comme la biochimie, la microbiologie, la pharmacologie et la physique.
Méthode 1 sur 2: effectuer une dilution de base
- 1Déterminez le bon liquide de dilution. Le liquide dans lequel vous allez diluer votre substance est très important. De nombreuses solutions seront diluées dans de l'eau distillée, mais ce n'est pas toujours le cas. Si vous diluez des bactéries ou d'autres cellules, vous souhaiterez probablement diluer dans des milieux de culture. Le liquide que vous choisissez sera utilisé pour chaque dilution en série.
- Si vous ne savez pas quel liquide utiliser, demandez de l'aide ou vérifiez en ligne si d'autres personnes ont effectué une dilution similaire.
- 2Préparez plusieurs tubes à essai avec 9 ml de liquide de dilution. Ces tubes vous serviront de blancs de dilution. Vous ajouterez votre échantillon non dilué dans le premier tube, puis vous le diluerez en série dans les tubes suivants.
- Il est utile d'étiqueter tous vos tubes avant de commencer afin de ne pas vous tromper une fois que vous avez commencé les dilutions.
- Chaque tube sera une dilution de 10 fois à partir du tube non dilué. Le premier tube sera une dilution 1:10, le deuxième 1:100, le troisième 1:1000, etc. Déterminez le nombre de dilutions que vous devez faire au préalable afin de ne pas gaspiller de tubes ou de liquide de dilution.
- 3Préparez un tube à essai avec au moins 2 ml de votre solution non diluée. La quantité minimale nécessaire pour effectuer cette dilution en série est de 1 ml de solution non diluée. Si vous n'avez que 1 ml, vous n'aurez plus de solution non diluée. Étiquetez ce tube aux États-Unis pour une solution non diluée.
- Mélangez soigneusement votre solution avant de commencer toute dilution.
Comment faire des dilutions en série sur des cultures bactériennes? - 4Effectuer la première dilution. Prélever 1 ml de solution non diluée du tube à essai US avec une pipette et le transférer dans le tube à essai étiqueté 1:10 contenant 9 ml du liquide de dilution et bien mélanger. Il y a maintenant 1 ml de solution non diluée dans 9 ml de liquide de dilution. La solution a donc été diluée d'un facteur 10.
- 5Effectuez la deuxième dilution. Pour la deuxième dilution en série, vous prendrez 1 ml de solution du tube 1:10 et l'ajouterez aux 9 ml de liquide de dilution dans le tube 1:100. Mélanger soigneusement le tube 1:10 avant de l'ajouter au tube suivant. Encore une fois, mélanger le tube 1:100 après dilution. La solution du tube à essai 1:10 a été diluée 10 fois dans le tube à essai 1:100.
- 6Prolongez cette procédure pour effectuer des dilutions en série plus longues. Ce processus peut être répété autant de fois que nécessaire pour obtenir la solution souhaitée. Dans une expérience impliquant des courbes de concentration, vous pouvez utiliser une dilution en série pour créer une série de solutions avec des dilutions de 1, 1:10, 1:100, 1:1000.
Méthode 2 sur 2: calcul du facteur de dilution final et de la concentration
- 1Calculer le rapport de dilution final dans une dilution en série. Le taux de dilution total peut être déterminé en multipliant le facteur de dilution de chaque étape menant à l'étape finale. Ceci peut être illustré mathématiquement par l'équation D t = D 1 x D 2 x D 3 x... x D n où D t est le facteur de dilution total et D n est le rapport de dilution.
- Par exemple, disons que vous avez fait une dilution 1:10 de votre liquide 4 fois. Branchez votre facteur de dilution dans l'équation: D t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10000
- Le facteur de dilution final du quatrième tube de votre dilution en série est de 1:10000. La concentration de votre substance est maintenant 10000 fois inférieure à celle de la solution non diluée d'origine.
Ensuite, utilisez une pipette pour transférer 1 millilitre de la solution non diluée dans l'un des tubes à essai remplis du liquide de dilution. - 2Déterminer la concentration de la solution après dilution. Pour déterminer la concentration finale de votre solution après dilution en série, vous aurez besoin de connaître votre concentration de départ. L'équation est C final = C initial /D où C final est la concentration finale de la solution diluée, C initial est la concentration initiale de la solution d'origine et D est le taux de dilution précédemment déterminé.
- Par exemple: si vous avez commencé avec une solution de cellules avec une concentration de 1000 000 cellules par ml et que votre taux de dilution est de 1 000, quelle est la concentration finale de votre échantillon dilué?
- En utilisant l'équation:
- C final = C initial /D
- C final = 100.000/1000
- C final = 1000 cellules par ml.
- 3Confirmez que toutes les unités correspondent. Lorsque vous effectuez un calcul, vous voulez vous assurer que vos unités correspondent toujours à la fin. Si vous avez commencé avec des cellules par ml, assurez-vous de terminer avec des cellules par ml. Si votre concentration de départ est de parties par million (ppm), alors votre concentration finale doit être de ppm.
Lisez aussi: Comment reconnaître le type d'une réaction?
Questions et réponses
- Lors de la dilution en série, pourquoi dois-je changer les embouts et bien mélanger avant de passer à la dilution suivante?Changez les pointes afin d'obtenir une dilution précise. Bien mélanger afin de s'assurer que la solution a des quantités égales partout.
- Si j'avais 2 ml d'une substance et que j'ajoutais ensuite 4 ml d'une dilution, quel serait mon rapport?2 ml de substance est votre solution mère concentrée, 4 ml est votre diluant, tel que l'eau. Volume de solution concentrée/volume final - 2 ml/2 ml + 4 ml = 0,33 = 0,33 ou 1:3.
- S'il n'y avait pas de colonie bactérienne visible formée sur mon assiette, que puis-je conclure?Différentes choses peuvent être conclues. La température d'incubation de votre plaque est peut-être trop élevée ou trop basse. Les médias qui ont été utilisés pourraient également être un problème; certaines bactéries ne peuvent pas se développer dans certains milieux alors que d'autres le peuvent. De plus, les bactéries pourraient avoir besoin de plus de temps que d'habitude pour montrer leur croissance. N'importe lequel d'entre eux pourrait être une possibilité, ce qui signifie que davantage de tests doivent être effectués pour comprendre et résoudre complètement le problème et parvenir à une conclusion.
- Comment puis-je mettre en place une série de tubes avec une dilution 1:4 de telle sorte que je me retrouve avec 3 ml de solution dans chaque tube à la fin de la procédure?Si vous utilisez 4 tubes, au total, après dilution, cela fait 12 ml. C'est 3 ml multiplié par le nombre de tubes, ce qui fait 4. Si votre dilution est de 1:4, alors c'est un quart (0,25) du total après dilution. Un quart de 12 ml équivaut à 3 ml. Donc, 3 ml non dilués pour 9 ml d'eau (ou tout ce que vous utilisez pour diluer), 9 + 3 = 12 divisé par 4 = 3. Cela signifie que vous devriez avoir 3 ml dans chaque tube si vous divisez la quantité totale dans les 4 tubes.
- Que se passe-t-il pendant le processus de dilution?Les molécules sont dispersées dans l'eau et sont plus éloignées, ce qui rend la concentration plus faible.
- Comment puis-je composer une solution saline de dextrose à 2% à partir d'une solution saline de dextrose à 5%?cela dépend du volume de dextrose à 2% à préparer: en supposant que vous prépariez 10 ml, utilisez la formule: c1v1=c2v2, où c-concentration et v-volume. 2x10=5xv, 20= 5v, v=4, cela implique que vous prenez 4 ml de solution saline de dextrose à 5% et complétez à 10 ml avec de l'eau distillée stérile.
Questions sans réponse
- Comment connaître la dilution de 2 solutions différentes réunies?
- Comment connaître les dilutions de différentes concentrations?
- Les dilutions en série sont-elles dangereuses?
- Je n'ai pas pipeté la bonne quantité de solvant lors d'une dilution en série. Que va-t-il se passer?
- Comment faire des dilutions en série sur des cultures bactériennes?
Les commentaires (18)
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- Je faisais une expérience dans un laboratoire avec un médecin, mais je ne comprenais pas comment effectuer la méthode de dilution en série. En cherchant sur Internet des réponses faciles à comprendre, je l'ai finalement trouvé sur guide. Merci beaucoup!
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