Comment faire un frottis bactérien stérile?
Lors de la réalisation d'un frottis bactérien, il est important de garder les cultures et les lames non contaminées pour visualiser correctement le microbe au microscope.
Lors de la réalisation d'un frottis bactérien, il est important de garder les cultures et les lames non contaminées pour visualiser correctement le microbe au microscope. C'est encore plus important lorsqu'il s'agit de bactéries potentiellement dangereuses ou pathogènes. L'utilisation d'une technique aseptique et d'une stérilisation à l'éthanol gardera la culture d'origine utilisée pure, la lame créée pour être visualisée non contaminée et vous serez à l'abri des infections.
Partie 1 sur 4: nettoyer votre espace de travail
- 1Retirez tous les équipements et objets inutiles de la paillasse du laboratoire.
- Laisser des objets sur la paillasse du laboratoire peut gêner ou représenter un danger pour la sécurité. Le papier laissé sur le banc peut prendre feu si un bec Bunsen est renversé.
- 2Injectez du désinfectant liquide sur la paillasse du laboratoire.
- Utilisez un désinfectant liquide destiné aux surfaces dures, contenant de l'eau de javel ou de l'éthanol.
- 3Utilisez une éponge jetable pour nettoyer le dessus de la table.
- 4Laissez la paillasse sécher à l'air libre.
- Cela laisse plus de temps au désinfectant pour tuer les microbes et empêche la recontamination par une serviette ou un gant de toilette.
Cela tue toutes les bactéries restantes sur la boucle d'inoculation et la rend stérile et prête pour la prochaine culture ou stockage.
Partie 2 sur 4: se rendre stérile
- 1Attachez vos cheveux en toute sécurité s'ils sont longs.
- Les cheveux longs peuvent non seulement gêner votre travail, mais peuvent également devenir dangereux autour d'une flamme nue.
- 2Mettez une blouse de laboratoire propre et des lunettes de protection.
- Ne portez pas de lunettes de sécurité car elles ne couvrent pas complètement vos yeux et vous protègent des éclaboussures.
- 3Lavez-vous soigneusement les mains.
- Utilisez du savon et lavez à mi-hauteur de votre avant-bras. Cela réduit le risque de contaminer votre culture avec des bactéries de votre peau.
- 4Mettez des gants en latex bien ajustés.
- Si vous êtes allergique au latex, utilisez des gants en vinyle ou en nitrile pour éviter une réaction.
- Des gants trop serrés risquent de se déchirer et de vous exposer au microbe.
- Portez les gants remontés sur vos manches pour éviter qu'ils ne traînent dans les cultures ou les lames.
Laissez la boucle refroidir avant de l'utiliser, ou risquez de tuer les bactéries dans votre culture, d'aérosoliser les bactéries ou de vous brûler les mains/l'équipement.
Partie 3 sur 4: garder votre culture pure
- 1Nettoyez chaque lame à utiliser.
- Utilisez un nettoyant en poudre (comme Comet) et lavez les lames dans un évier avec de l'eau tiède pour enlever tout ce qui reste des utilisations précédentes.
- 2Séchez les lames à l'air ou utilisez du papier absorbant pour sécher les lames.
- 3À l'aide de pinces, trempez chaque lame dans de l'éthanol à 95% pour stériliser et passer à travers la flamme.
- C'est la stérilisation à l'éthanol.
- Assurez-vous de laisser l'éthanol brûler complètement avant de poser la lame ou de remettre la pince dans l'éthanol, sinon vous risquez d'allumer un feu.
- 4Flammer la boucle d'inoculation avant et après chaque utilisation.
- C'est la technique aseptique.
- Tenez la pointe et la tige de la boucle d'inoculation dans la flamme du bec Bunsen pendant au moins 10 secondes, en permettant au métal de devenir orange vif.
- Laissez la boucle refroidir avant de l'utiliser, ou risquez de tuer les bactéries dans votre culture, d'aérosoliser les bactéries ou de vous brûler les mains/l'équipement.
- 5Passer l'ouverture du tube à essai à travers la flamme lorsque le bouchon est retiré.
- Cela chauffe l'air à l'intérieur et autour de l'ouverture du tube à essai, le faisant monter ainsi que les bactéries présentes dans l'air et empêchant la contamination de la culture.
- 6Flambez à nouveau la boucle après avoir transféré les bactéries sur la lame.
- Cela tue toutes les bactéries restantes sur la boucle d'inoculation et la rend stérile et prête pour la prochaine culture ou stockage.
- 7Passer à nouveau l'ouverture du tube à essai dans la flamme avant de remettre le bouchon.
Partie 4 sur 4: nettoyage
- 1Nettoyer soigneusement toutes les lames utilisées.
- Rincez la glissière dans l'évier et dans le drain si vous utilisez des bactéries sûres.
- Nettoyer avec de l'eau et un nettoyant en poudre (comme Comet).
- 2Placer tous les tubes à essai et les cultures utilisés dans le bac/chariot de danger biologique approprié.
- Transportez toujours tous les tubes à essai dans un porte- tubes à essai pour réduire le risque de les faire tomber et de les casser, contaminant ainsi le laboratoire.
- 3Nettoyez à nouveau la paillasse du laboratoire.
- Utilisez à nouveau un désinfectant liquide et des éponges jetables pour nettoyer l'espace de travail. Laisser sécher à l'air.
- 4Retirez les gants en latex et jetez-les dans un bac à déchets biologiques.
- Retirez correctement vos gants en latex. Évitez de toucher l'extérieur du gant à main nue.
- Retirez votre gant droit en saisissant l'extérieur du gant près de votre poignet et en tirant le gant à l'envers jusqu'au bout de vos doigts et retirez-le.
- Tenez votre gant droit dans votre main gauche gantée et insérez deux doigts de votre main droite dans l'intérieur du gant gauche près de votre poignet, en évitant de toucher l'extérieur du gant.
- Tirez le gant gauche à l'envers et hors de votre main, en laissant votre gant droit à l'intérieur.
- Jetez les deux gants dans le bac à déchets biologiques, en prenant soin de ne toucher que l'intérieur des gants.
- 5Enlevez les lunettes et la blouse de laboratoire.
- 6Se laver soigneusement les mains avec du savon.
Lorsque vous faites un frottis avec des bactéries pathogènes opportunistes, ne touchez jamais votre visage ou tout autre vêtement que la blouse de laboratoire ou risquez une infection.
- Lorsque vous travaillez avec un bec Bunsen, faites toujours attention à la flamme nue et gardez votre espace de travail à l'écart des objets qui pourraient prendre feu en cas de renversement.
- Lorsque vous faites un frottis avec des bactéries pathogènes opportunistes, ne touchez jamais votre visage ou tout autre vêtement que la blouse de laboratoire ou risquez une infection.
- Assurez-vous que tout le feu est éteint ou éteint sur l'équipement avant de le remettre à l'éthanol, ou risquez de mettre le feu à l'ensemble du conteneur.
- N'utilisez pas la stérilisation à l'éthanol sur la boucle d'inoculation car l'éthanol corrodera le métal de l'instrument.
- Assurez-vous que la boucle d'inoculation est refroidie avant de la plonger dans le bouillon de culture. Si la boucle est trop chaude, elle peut faire bouillir le bouillon et aérosoliser les bactéries, qui peuvent alors pénétrer dans les voies respiratoires si elles sont inhalées.
- Ne chauffez pas les lames de verre trop longtemps ou risquez de surchauffer et de casser le verre.
- Désinfectant liquide
- Éponge jetable
- Blouse de laboratoire
- Gants en latex
- Des lunettes de protection
- 70 - 90% Éthanol
- Forceps
- Boucle d'inoculation
- Bec Bunsen
- Lames de verre
- Culture bactérienne
Lisez aussi: Comment faire fondre la glace rapidement?
