Comment préparer une tache simple?
Essayez de couvrir tout le cercle cible avec la tache, mais n'en mettez pas trop ou ce sera trop difficile à observer au microscope.
Un colorant est une solution constituée d'un solvant et d'une molécule colorée appelée chromogène. L'utilisation de colorants basiques est importante car elle permet à la cellule et à ses composants de devenir visibles au microscope.
- 1Nettoyez votre diapositive.
- Pour nettoyer le toboggan, vous pouvez utiliser de l'eau du robinet, assurez-vous que l'eau n'est pas trop chaude ou trop élevée car cela provoquerait la rupture du toboggan.
- 2Séchez la lame avec des serviettes en papier ou du papier pour lentilles.
- 3Dessinez un cercle cible au dos de la diapositive.
- Utilisez un sharpie bleu pour cela car la couleur sera plus visible. Ce cercle servira de cible pour y placer vos organismes et saura également où regarder au microscope, d'où son nom, cercle cible.
- 4Placez une goutte d'eau sur le cercle cible: cette eau va retenir vos organismes sur le toboggan
- 5Flammer l'anse d'inoculation.
- Tenez la boucle à la fin et placez la partie de la boucle dans le feu. Vous voulez que la boucle soit chauffée au rouge, ce qui la laissera devenir stérile.
- 6Laissez la boucle refroidir.
- Tenez la boucle quelques secondes pour qu'elle refroidisse, si la boucle est trop chaude vous brûlerez vos bactéries.
- Ne faites pas pivoter la boucle pour la refroidir ou vous brûlerez quelqu'un autour de vous
- 7Prenez une boucle ou votre organisme. Placez la boucle sur les organismes que vous voulez et frottez DOUCEMENT l'organisme sur la surface pour l'amener sur la boucle. N'en prenez pas trop ou ce sera trop épais pour voir au microscope
- 8Mélanger les organismes dans l'eau sur le toboggan: répartir les organismes et l'eau autour de la barrière du cercle cible jusqu'à ce qu'une fine couche d'eau recouvre le cercle
- 9Flammer la boucle d'inoculation à nouveau. Flamber à nouveau la boucle aide à la garder stérile, laissez refroidir à nouveau et placez-la sur le côté
- 10Fixez la glissière à la chaleur.
- À l'aide de votre porte-diapositive, saisissez la lame et passez-la plusieurs fois dans la flamme pour permettre au processus de thermofixation de se produire. Le processus de fixation à chaud tue toutes les bactéries qui peuvent être présentes et fait coller la cellule à la lame.
- Ne pas surchauffer la lame ou la cellule peut devenir déformée ou floue sous le microscope
- 11Laissez la lame refroidir. Tenez toujours la diapositive, laissez-la refroidir pendant environ 30 secondes à une minute
- 12Mettez des gants maintenant pour passer à l'étape suivante. Les gants vous protégeront de la teinture qui servira à tacher la lame
- 13Placez le bac à coloration sur le coin de l'évier. Cela permettra à l'excès de tache que vous avez mis dans l'évier de s'écouler. Ça va faire un gros gâchis dans l'évier
- 14Recouvrir le frottis de quelques gouttes de bleu de méthylène. Essayez de couvrir tout le cercle cible avec la tache, mais n'en mettez pas trop ou ce sera trop difficile à observer au microscope.
- 15Attendez 30 à 60 secondes pour laisser la tache teindre le frottis.
- 16Saisissez la lame avec le porte-lame et rincez.
- À l'aide de la bouteille d'eau à gicler, visez un angle de 45 degrés en commençant par le haut de l'endroit où le frottis commence à gicler votre eau. Il doit être à ce degré afin de ne pas éliminer les organismes que vous avez tachés.
- 17Séchez délicatement avec le papier absorbant: Vous pouvez placer la lame entre les pages du papier absorbant et appuyer doucement sur le livret. Cela doit être fait doucement ou vous pourriez casser votre diapositive
- 18Prêt à observer au microscope: Vous pouvez voir les organismes sous les objectifs 10x et 40x
Les gants vous protégeront de la teinture qui sera utilisée pour tacher la lame.
- Toute personne ayant des cheveux longs doivent avoir leurs cheveux attachés en
- Portez des lunettes anti-éclaboussures
- Porter fermé dans des chaussures
- risque d'incendie
- Lunettes anti-éclaboussures
- Lame de microscope en verre propre
- Bec Bunsen
- Teinture bleu de méthylène
- Gants jetables
- Bouteille d'eau avec de l'eau
- Bac à coloration
- Papier bibliographique
- Porte-diapositive
- Microscope composé
- Papier pour lentilles/essuie-tout
- Nettoyeur de lentille
- Boucle inoculant
- Organismes
- Sharpie bleu
- Des lunettes de protection
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